實(shí)驗(yàn)原理
脂肪是丙三醇(甘油)和脂肪酸結(jié)合成的脂類化合物,能溶于脂溶性有機(jī)溶劑。
本實(shí)驗(yàn)用重量法,利用脂肪能溶于脂溶性溶劑的這一特征,用脂溶性溶劑將脂肪提取出來,借蒸發(fā)除去溶劑后的稱量。整個提取過程均在索氏提取器中進(jìn)行。通常使用的脂溶性溶劑為Diethyl Ether或沸為30~60℃的石油醚。用此法提取的脂溶性物質(zhì)除脂肪外,還含有游離脂肪酸、磷脂、固醇、芳香油及某些色素等,故稱為“粗脂肪”。
(一)器材
(1)水浴鍋。
(2)烘箱。
(3)索氏提取器一套,研缽一個。
(4)脫脂濾紙及脫脂棉花。
(5)分析天平。
(二)試劑
無水Diethyl Ether(AR)
(三)材料
樣品(芝麻、花生、大豆或玉米)。
實(shí)驗(yàn)程序
(一)操作方法
1.裝置索氏脂肪提取器
1樣品的制備
將樣品置80~100℃真空烘箱烘至恒重,放冷后研成粉末,稱取樣品3.00g,放入干燥濾紙筒內(nèi),以脫脂棉花蓋之。
2 提取
將盛有樣品的濾紙筒放入索氏提取器內(nèi),注意勿使筒內(nèi)樣品高出提取器的虹吸管加入Diethyl Ether約占提取管容積1/3,以浸濕樣品,同時向已知重量的提取瓶內(nèi)加入約占其容積1/3的Diethyl Ether。
3將儀器各部連接如右圖,夾穩(wěn),并置于恒溫水浴鍋上,使提取瓶底部浸入水中,開啟自來水,使水從冷凝器下孔流入,上孔流出,然后開啟水浴鍋開關(guān),加熱水浴。當(dāng)溫度上升至Diethyl Ether沸點(diǎn)時,Diethyl Ether開始沸騰,并形成蒸汽由連接管上升至冷凝器,蒸氣遇冷而成液體,滴入提取管內(nèi)將樣品浸泡,樣品的脂肪將逐漸溶于其中,當(dāng)液面超過虹吸管上端時,溶有脂肪的Diethyl Ether經(jīng)虹吸管流入提取瓶。調(diào)節(jié)水浴溫度至50~60℃,使Diethyl Ether每小時循環(huán)3~5次,提取時間視樣品性質(zhì)而定,通常要12~16h。
4.干燥及稱重
提取完畢后,卸下的提取瓶,在水浴上蒸餾回收Diethyl Ether(避免著火)。清洗提取瓶外壁,zui后把提取瓶置104℃恒溫烘箱中烘至恒重。
5.結(jié)果處理
粗脂肪(%)=(m2-m1)×100/m
式中:m——風(fēng)干試樣重量,
ml——已恒重的抽提瓶重量,
m2——已恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量,
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