實驗原理
聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺和交聯(lián)劑在加速劑過硫酸銨或核黃素的作用下聚合交聯(lián)成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠,以此凝膠為支持物的電泳稱為聚丙烯酰胺凝膠電泳。
聚丙烯酰胺凝膠具有下列特性:
1. 在一定濃度時,凝膠透明,有彈性,機(jī)械性能好;
2. 化學(xué)性能穩(wěn)定,與被分離物不起化學(xué)反應(yīng),在很多溶劑中不溶;
3. 對PH和溫度變化較穩(wěn)定;
4. 幾乎無吸附和電滲作用,只要Acr純度高,操作條件一致,則樣品分離重復(fù)性好;
5. 樣品不易擴(kuò)散且用量少;
6. 凝膠孔徑可調(diào)節(jié),根據(jù)被分離物的相對分子質(zhì)量選擇合適的濃度,通過改變單體及交聯(lián)劑的濃度調(diào)節(jié)凝膠的孔徑;
7. 分辨率高。
血清蛋白在紙或醋酸纖維薄膜電泳中,只能分離出5~6條區(qū)帶,而聚丙烯酰胺電泳卻可分離出數(shù)十條區(qū)帶,因而,目前PAGE已廣泛用于科研、農(nóng)、醫(yī)及臨床診斷的分析、制備,如蛋白質(zhì)、酶、核酸、血清蛋白、脂蛋白的分離及病毒
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