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紅細(xì)胞膜的制備的實驗原理

更新時間:2020-06-08 點(diǎn)擊次數(shù):3372

實驗原理

生物膜的研究發(fā)展迅速,要研究生物膜的組成、結(jié)構(gòu)及功能,首先必須分離出純凈的細(xì)胞膜。

 

分離狀態(tài)下的哺乳動物的紅細(xì)胞膜,一般稱為“血影”。哺乳動物的紅細(xì)胞中沒有通常真核生物細(xì)胞內(nèi)所含有的任何細(xì)胞器,容易制備得到純粹的細(xì)胞膜,取材方面來源也十分方便,是研究細(xì)胞膜的好材料。

 

從哺乳動物紅細(xì)胞中分離細(xì)胞質(zhì)膜:

一步是收集血液并置于加有抗凝劑的容器內(nèi),用低速離心的方法從血液中分離得紅細(xì)胞,然后用等滲緩沖液重復(fù)洗滌多次,去除血漿。

二步,將洗凈的紅細(xì)胞從等滲緩沖液轉(zhuǎn)移到低滲緩沖液中,由于滲透壓力作用于細(xì)胞質(zhì)膜,使紅細(xì)胞膨脹而溶血。

后一步,將溶血的紅細(xì)胞經(jīng)過充分反復(fù)洗滌,高速離心,去除血紅蛋白和其他細(xì)胞內(nèi)含物。這樣制備所獲得的終產(chǎn)品幾乎全是紅細(xì)胞膜。

 

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